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通过易错PCR方法建立了一个鼠肺不同长度的nGLP-1R (从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸) 的噬菌体随机突变展示肽库，通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体N端片段 (nGLP-1R) 在缺失一段或两段基因后是否还具有结合Exendin-4的活性。经ELISA分析发现了一株无结合活性的突变株，命名为EP16。经测序比对，发现EP16缺失了前20个和后10个氨基酸，且第52位色氨酸突变为精氨酸。为确定EP16与Exendin-4无结合活性的原因，重新构建了无前20个和后10个氨基酸的EP16野生型及第52位色氨酸变为精氨酸的全长nGLP-1RW52R与EP16进行对比分析。结果表明，EP16的活性丧失是由保守的第52位色氨酸突变为精氨酸引起的，缺失的前20个和后10个氨基酸没有影响其生物学活性。关键位点单个氨基酸残基的突变可以改变胰高血糖素样肽1受体N端片段整个蛋白质的生物学活性。

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《保守的第52位色氨酸突变引起的胰高血糖素样肽1受体N端片段活性丧失》

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文件号：088756

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