基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化

时间:2023-09-02 17:31:15
作者:张赛
关键字:黄曲霉毒素解毒酶,稳定性,定向进化,易错PCR
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运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶 (HRP)-隐性亮绿 (RBG) 快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70 ℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突变酶A1476,pH 4.0和pH 7.5均表现稳定性的突变酶A2863,其酶活力比野生酶分别提高了6.5倍、21倍和12.6倍。经序列分析表明,发现突变酶A1773发生了Glu127Lys和Gln613Arg突变;突变酶A2863发生了Gly73

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基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化
《基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化》
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