转运系统集成改造提升大肠杆菌胞外蛋氨酸积累

时间:2023-07-24 00:33:33
作者:董伟,李由然,张梁,丁重阳,石贵阳
关键字:大肠杆菌,转运系统,L-蛋氨酸,基因敲除
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通过构建大肠杆菌( Escherichia coli)W3110 MetD吸收系统编码基因 metI、metN、metQ单个缺损菌株,获得胞外蛋氨酸吸收速率最小菌株;游离及染色体整合表达 YjeH和 YeaS分泌系统编码基因 yjeH和 yeaS,研究增强蛋氨酸分泌与弱化蛋氨酸吸收集成改造策略对菌体胞外蛋氨酸积累和生物量的影响,为理性构建蛋氨酸高产菌株提供可行策略。实验结果表明,基因 metI的缺损对胞外蛋氨酸的吸收影响最大,吸收速率降低了16.7%;游离表达基因 yjeH和 yeaS,胞外蛋氨酸开始积累,胞外蛋氨酸最大积累量为0.21 g/L和0.18 g/L;染色体整合表达基因 yjeH和 yeaS,胞外蛋氨酸的最大积累量为0.48 g/L和0.25 g/L,与游离表达相比提高了128%和38.9%。增强蛋氨酸分泌与弱化蛋氨酸吸收集成改造策略对于促进胞外蛋氨酸的积累效果显著,可以作为理性构建蛋氨酸高产菌株的策略。

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