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基于脂肪氧合酶（LOX）活性对宿主菌潜在的危害，分别共表达了超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，以期提高铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa BBE 来源的LOX在大肠杆菌Escherichia coli Rosetta（DE3）中的表达。将P. aeruginosa BBE 超氧化物歧化酶基因sodB和sodM及E. coli过氧化氢酶基因katE克隆至 pRSFDuet-1，分别得到表达质粒pRSF-sodB，pRSF-sodM和pRSF-katE，将上述表达质粒转化至表达LOX的重组大肠杆菌N6，得到菌株N6-B，N6-M和N6-K。在20 ℃和1 mmol/mL异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）条件下诱导70 h，N6-B、N6-M和N6-K胞内外LOX总酶活分别为21.6、28.1和7.1 U/mL，其中N6-B和N6-M较对照菌株N6（11.8 U/mL）提高了83%和138%。通过正交实验确定LOX较优的诱导表达条件为：IPTG 浓度2 mmol/mL，诱导菌体浓度（OD600）2.5，诱导温度20 ℃。研究结果表明：共表达超氧化物歧化酶能有效促进LOX在大肠杆菌中的表达，为该酶高效异源表达研究提供了新思路。

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《共表达抗氧化酶促进脂肪氧合酶在大肠杆菌中的表达》

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文件号：301290

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