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目的 探讨环磷腺苷效应元件结合蛋白1（cAMP-response element binding protein 1,CREB1）基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 针对人CREB1的基因序列设计并构建2条短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA），采用慢病毒转染shRNA至人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞系抑制其CREB1的表达。将实验组分为shCREB1#1组和shCREB1#2组，同时将shSCR空载质粒转染至上述细胞系作为阴性对照组。采用实时定量PCR和Western印迹法检测转染效率；CCK-8法检测细胞增殖能力；集落形成实验检测细胞集落形成能力；流式细胞术检测细胞周期和凋亡率；细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；Western印迹法检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 相较于阴性对照组，shCREB1#1和shCREB1#2组MCF-7和MDA-MB-231细胞CREB1基因的mRNA和蛋白表达水平均下降（P＜0.001）。沉默CREB1后，MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖能力、集落形成能力、迁移和侵袭能力减弱，且凋亡率升高（P＜0.05）。沉默CREB1使细胞周期蛋白CDK2、CDK4、CDK6、Cyclin D1以及抗凋亡蛋白Bcl-2、Survivin的表达下调，而使促凋亡蛋白Caspase 3和Bax的表达上调（P＜0.05）。结论 沉默CREB1可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并诱导其凋亡。

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《沉默环磷腺苷效应元件结合蛋白1对乳腺癌细胞生物学行为的影响》

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文件号：110468

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