高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系

时间:2022-11-20 12:47:03
作者:李湘鸣
关键字:环境雌激素, 酵母细胞, 雌激素受体, 绿色荧光蛋白, 高通量测评
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以载体双表达的方式构建重组酵母环境雌激素的评价体系, 用于快速筛选雌激素类化合物。在表达载体中, 用3-磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)启动子驱动a人雌激素受体基因(hERa)的表达; 在报告载体中, 用雌激素效应元件(ERE)调控的绿色荧光蛋白(yEGFP)作为报告基因。将两者转化于酵母细胞(W303-1A)中, 构建成重组绿色荧光蛋白酵母细胞。该酵母细胞经不同浓度的雌激素类化合物作用后, 发现GFP的表达量与此类受试物具有明显的剂量效应关系。与其他环境雌激素酵母评价体系相比, 该重组酵母评价细胞, 在应用时不需要破坏细胞壁, 也不需要底物和相关试剂, 可直接在96孔板中操作完成, 具有快速、高通量、敏感性高、重现性好及廉价等特点。

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高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系
《高通量筛选雌激素类化合物重组绿色荧光蛋白酵母细胞测评体系》
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