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家蚕二分浓核病毒 (Bombyx mori bidensovirus, BmBDV) 是特异性感染家蚕中肠引起慢性浓核病症的致病原，基因组含有2套单链DNA分子 (VD1和VD2)，复制机制尚不清楚。为了能够在体外拯救出有感染性的病毒粒子，构建了BmBDV的基因组全长的克隆质粒pMD18T-VD1和pUC-VD2，并通过酶切构建的克隆质粒来获得双链的基因组片段VD1和VD2，利用脂质体包埋的方法，线性化共转染BmN细胞。提取转染后的BmN细胞总DNA，经去甲基化处理后，通过PCR检测到病毒基因的复制；提取转染后的BmN细胞和添食回感的家蚕中肠的总蛋白，分别进行蛋白质印记杂交检测，检测到病毒基因的表达。由此首次表明，该病毒线性化的基因组片段通过共转染BmN细胞的方法，可以在体外条件下拯救出具有感染性的病毒粒子。

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《家蚕二分浓核病毒在家蚕细胞中的体外拯救》

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文件号：088420

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