Ad-ERα-36-Fc-GFP的制备及鉴定

时间:2023-06-07 00:52:20
作者:谢雨琼,李春春,李晓烨,陈丽红,严毛晓,曹江
关键字:Ad-ERα-36-Fc-GFP,腺病毒制备,诱饵受体,基因治疗
DOI:10.13345/j.cjb.210531
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ERα-36是雌激素受体α新亚型,促进肿瘤细胞增殖、侵袭及耐药,可作为治疗靶点,但目前仅有小分子靶向药物研发。利用重组腺病毒携带诱饵受体,可进行靶向ERα-36的基因治疗探索。首先通过基因工程技术,构建可表达由Igκ信号肽引导分泌的重组融合蛋白ERα-36-Fc的穿梭质粒pDC316-Ig κ-ERα-36-Fc-GFP;利用AdMaxTM腺病毒包装系统进行Ad-ERα-36-Fc-GFP腺病毒的包装、鉴定及扩增;感染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231并进行表达及功能验证。结果表明成功制备Ad-ERα-36-Fc-GFP重组腺病毒,可高效感染三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231,表达并分泌ERα-36-Fc重组蛋白,显著抑制EGFR/ERK信号通路。Ad-ERα-36-Fc-GFP腺病毒的制备为进一步开展靶向ERα-36的肿瘤基因治疗研究奠定基础。

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Ad-ERα-36-Fc-GFP的制备及鉴定
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