余甘子多糖的结构表征及免疫增强作用

时间:2022-04-11 04:41:10
作者:孟祯,孙梦珂,许永得,秦韬,任喆
关键字:余甘子多糖,结构表征,新城疫疫苗,免疫佐剂,
DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.012.029
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摘要: 本试验旨在制备余甘子多糖(Phyllanthus emblica polysaccharide,PEP),通过对其结构表征进行分析,探索PEP对鸡新城疫(Newcastle disease,ND)疫苗免疫效果的影响。利用紫外光谱(ultraviolet spectroscopy,UV)、红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)、高效液相色谱分析法(high performance liquid chromatography,HPLC)和扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)分析PEP结构;选取175只1日龄河田鸡,随机分成5组,每组35只,分别为空白对照组,疫苗对照组,PEP低、中、高剂量组。除空白对照组外均用ND疫苗进行免疫,7日龄首免,并于28日龄二免。在免疫的同时,PEP低、中、高剂量组分别按照10、20、30 g·L-1的剂量给药PEP溶液0.5 mL,疫苗对照组和空白对照组给予等量生理盐水,每天1次,连续3 d。分别于7、14、21、28、35、42和49日龄时,测定血清中新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)特异性抗体水平以及γ-干扰素(INF-γ)和白介素4(IL-4)的水平;于28和49日龄时测定外周血淋巴细胞增殖活性和T淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;于49日龄剖杀后采集脾、法氏囊、胸腺和肝进行组织学观察以及检测免疫器官指数。结果表明,PEP为白色棉絮状,糖含量为(86.70±1.05)%,结构分析结果表明,PEP是含α型糖苷键的多糖,其组分均一,不含核酸和蛋白质,呈片状分布,总体结构规整且致密,单糖组成为葡萄糖醛酸(glucuronic acid,GlcA)、葡萄糖(glucose,Glu)、木糖(xylose,Xyl)和岩藻糖(fucose,Fuc),其摩尔比为0.5:8.3:1.8:0.3。动物试验结果表明,PEP能显著提高鸡血清中NDV特异性抗体、INF-γ和IL-4的水平(P

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