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摘要: 旨在建立检测非洲猪瘟病毒(ASFV)血清抗体的阻断ELISA方法。采用原核表达的ASFV p54蛋白作为包被抗原,并制备了针对p54蛋白的单克隆抗体,采用方阵滴定法确定了阻断ELISA方法的最佳反应条件,并对建立的方法进行了敏感性、特异性、重复性和符合性评价。结果显示,抗原最佳包被浓度为2.0 μg·mL-1,抗原包被温度及时间为4℃过夜,被检血清稀释度为1:40,酶标单抗稀释度为1:1 000,被检血清作用时间为1 h,酶标单抗作用时间为30 min,底物作用时间为10 min。经阴、阳性样品检测和特异性、敏感性试验,当临界值阻断率≥ 55.2%时,判定为阳性,当阻断率
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《非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立》
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文件号:127859
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