如需要完整文档点击下方 "点击下载文档" 按钮

摘要： 旨在研究重组克柔念珠菌（Candida krusei）14-3-3蛋白（rCK14-3-3）对奶牛乳腺上皮细胞（MAC-T）炎性反应的分子机制，为系统研究克柔念珠菌损伤奶牛乳腺上皮细胞的机制提供理论依据。采用原核表达的方法构建克柔念珠菌BMH1基因重组质粒并转化入大肠杆菌BL21（DE3）中，经诱导表达纯化后进行Western blot鉴定；CCK-8法筛选rCK14-3-3蛋白对MAC-T的最适作用浓度和时间；Western blot检测rCK14-3-3蛋白对MAC-T的Toll样受体、MAPK信号通路、NF-κB信号通路主要蛋白相对表达量的影响；ELISA检测rCK14-3-3蛋白对MAC-T中相关炎性因子IL-1β、IFN-γ、IL-18、TNF-α、IL-6、IL-12相对表达量的影响。结果显示：成功构建了pET-21a-BMH1重组表达载体，经诱导表达纯化后获得有生物学活性的rCK14-3-3蛋白，纯度达90%以上，浓度为0.2 mg·mL-1。与空白对照组相比，采用50 μg·mL-1的rCK14-3-3作用MAC-T，TLR2、TLR4、MyD88在1、3 h时表达量极显著升高（P

如需要完整文档点击下方 "点击下载文档" 按钮

《重组克柔念珠菌14-3-3蛋白诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的分子机制》

将 完整文档 下载到本地，方便收藏和查阅

文件号：127365

点击下载文档