hnRNPA3通过影响mRNA出核调控hESCs多能性

时间:2022-01-06 00:11:54
作者:杨嘉宾,陈仲扬,周凡琦,余佳,马艳妮
关键字:人胚胎干细胞,异质核核糖核蛋白A3,多能性与自我更新,mRNA运输
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摘要: 目的 探究RNA结合蛋白异质核核糖核蛋白A3(hnRNPA3)在人胚胎干细胞(hESCs)多能性维持中的生物学功能,揭示其在RNA运输过程中的新机制。方法 在hESC中通过核孔复合物免疫共沉淀及细胞核质分离检测hnRNPA3与核孔互作情况及定位;抑制hnRNPA3内源表达后进行克隆形成及碱性磷酸酶染色实验,qPCR检测多能性/分化标志基因的表达变化,利用RNA 荧光原位杂交技术检测对polyA+ RNA及OCT4 mRNA核质分布的影响;预测hnRNPA3与已知出核相关蛋白结合情况。结果 hnRNPA3定位在细胞核且与核孔互作,抑制hnRNPA3的内源表达后显著抑制了hESCs的克隆形成能力(P<0.05)并导致细胞分化标志基因表达水平升高(P<0.001),同时显著抑制了polyA+ RNA及OCT4 mRNA的出核(P<0.001)。蛋白质互作网络预测出hnRNPA3与约1/3的已知出核相关蛋白结合。结论 hnRNPA3通过影响mRNA出核调控hESCs多能性。

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