城市绿地中立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR快速检测方法

时间:2022-01-02 04:45:43
作者:雒淑红,骆玉珍,赵莺莺,张维维,刘文,何山文,安磊,王永杰,韩继刚
关键字:城市绿地土壤, 立枯丝核菌, 齐整小核菌, qPCR
DOI:10.11833/j.issn.2095-0756.20210801
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目的 土传病原真菌立枯丝核菌Rhizoctonia solani和齐整小核菌Sclerotium rolfsii严重威胁园林绿化植物正常生长。建立针对这2种土壤病原真菌的快速定量检测方法。 方法 通过筛选2种病原菌特异性引物,优化反应条件。 结果 初步建立了2种病原菌的实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。引物ST-RS1/ITS4和SRITSF/SRITSR可以分别用于立枯丝核菌和齐整小核菌的qPCR检测,其灵敏度分别达24×106和22×106拷贝·L−1,2次重复反应的变异系数分别为3.37%~4.61%和0.66%~8.61%。对上海绿地土壤样品的检测结果表明:立枯丝核菌和齐整小核菌的检出率分别为100%和19%。 结论 建立的qPCR检测方法具有较强特异性、较高灵敏度和较强重复性,可以用于上海城市绿地土壤中立枯丝核菌和齐整小核菌的快速、有效定量检测。图2表5参29

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