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为深入研究日本血吸虫细胞凋亡机制。利用PCR技术扩增得到Sjcaspase3的全长序列，其ORF含900 bp，编码299个氨基酸，理论分子量为33 509.7 Da，理论等电点为6.39。Real-time PCR分析表明该基因在日本血吸虫生长发育的各个时期均有表达，其中21 d表达量最高，42 d雌虫表达量高于42 d雄虫。成功构建了pXJ40-FLAG-Sjcaspase3重组质粒并转染到Hela细胞内，荧光定量PCR和Western blotting分析表明Sjcaspase3成功在Hela细胞中表达。酶活分析提示重组Sjcaspase3具有切割特异性底物天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸 (DEVD) 的活性。流式细胞术检测了Sjcaspase3可诱导Hela细胞发生早期细胞凋亡。研究结果为深入探讨Sjcaspase3的生物学功能及日本血吸虫细胞凋亡机制奠定了基础。

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《日本血吸虫凋亡基因Sjcaspase3的克隆、真核表达 及其功能分析》

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文件号：088363

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