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流感病毒的M2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用，是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组RNA作为模板，RT-PCR扩增H3N2亚型猪流感病毒M2基因，分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体，建立了M2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统，制备了M2重组蛋白，并免疫大鼠制备了多克隆抗体。Western blotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的M2蛋白和病毒感染细胞后表达M2蛋白，具有良好的特异性。重组M2真核表达载体转染Vero细胞，表达的重组M2蛋白大小为20 kDa，定位于细胞浆中，与病毒感染细胞中的M2蛋白定位相同。Western blotting检测表明M2蛋白在病毒感染细胞12 h后才能检出，晚于NS1、NP和M1，属于病毒复制的晚期蛋白，可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清M2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。

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《H3N2型猪流感病毒M2蛋白表达分析》

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文件号：089689

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