β-葡萄糖苷酶与透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的共表达

时间:2023-07-09 05:29:16
作者:邓发军
关键字:β-葡萄糖苷酶,大肠杆菌,透明颤菌血红蛋白,(VHb),双顺反子
DOI:10.13345/j.cjb.170198
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为解决大肠杆菌高密度发酵生产β-葡萄糖苷酶过程中溶氧不足的问题,分别采用双顺反子和T7启动子系统在Escherichia coli中引入透明颤菌血红蛋白 (VHb) 以改善溶氧的利用、提高菌体的生物量,进而增加β-葡萄糖苷酶的产量。以双顺反子形式诱导表达VHb时,在摇瓶低溶解氧条件下的最高生物量达到4.24±0.29 (OD600),与无VHb表达的对照组相比提高了35.03%,同时β-葡萄糖苷酶发酵酶活达到了 (9.78±0.55) U/mL,比对照组提高了25.38%。在3 L发酵罐中使用双顺反子形式共表达VHb时,β-葡萄糖苷酶发酵总酶活达到141.23 U/mL,与无VHb表达的对照相比提高了35.57%。以T7启动子对VHb进行表达后,在摇瓶和发酵罐中β-葡萄糖苷酶的发酵酶活均低于对照组。这些结果表明,在大肠杆菌中以双顺反子形式共表达β-葡萄糖苷酶和VHb能够提升菌体对低溶氧的耐受能力,提高菌体生物量和β-葡萄糖苷酶的产量。

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《β-葡萄糖苷酶与透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的共表达》
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