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β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶体，可作用于几丁质或壳聚糖等天然底物，从末端水解产生N-乙酰-β-D氨基葡萄糖 (GlcNAc) 单体，其在医药和农业领域有较广泛的用途。文中克隆了耐热菌凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans DMS1的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因 (BcNagZ)，并成功在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3) 进行了分泌表达，蛋白表达量达到0.76 mg/mL。纯化后的BcNagZ分子量为61.3 kDa，测得的比活力为5.918 U/mg；进一步对该酶进行表征，结果显示酶的最适反应pH为5.5，最适反应温度为75 ℃，在65 ℃处理30 min后还有85%的残余酶活力，表明该酶具有良好的热稳定性。该酶的米氏常数Km为0.23 mmol/L，Vmax为0.043 1 mmol/(L·min)。重组BcNagZ可以水解胶体几丁质得到微量的GlcNAc，可以将二糖水解为单糖；偶联已报道的外切几丁质酶AMcase，可以有效地将胶体几丁质水解为GlcNAc，得率达到86.93%。

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《凝结芽孢杆菌耐热β­N­乙酰氨基葡萄糖苷酶在大肠杆菌的分泌表达及其在制备GlcNAc中的应用》

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文件号：087168

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