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为了提高磷脂酶在毕赤酵母中的表达量，构建了N-乙酰转移酶（Mpr1）和磷脂酶共表达的重组毕赤酵母。Mpr1是一类能催化乙酰基团在乙酰辅酶A和胺之间转移的胞内酶，能够降低酵母细胞内的ROS水平，具有抗活性氧（ROS）氧化胁迫生理功能。来源于尖孢镰刀菌的磷脂酶（phospholipase）是一类可以将磷脂水解为小分子脂肪酸、甘二酯和磷酸胆碱的胞外酶。研究了Mpr1对重组菌的生长和磷脂酶表达量的影响。为了获得在3.6 L发酵罐中表达磷脂酶的最佳发酵条件，分别从诱导温度、起始诱导菌体浓度和甲醇诱导浓度3个方面研究了重组菌的高密度发酵，以恒溶氧反馈调节补加甘油和甲醇流加仪在线监测流加甲醇。结果表明：当诱导温度、起始诱导菌体质量浓度和甲醇诱导体积分数分别为28 ℃，40 g/L和1.0%，诱导120 h后磷脂酶活达到最高，为8 100 U/mL，总蛋白含量为8.3 mg/mL，为前期工作中磷脂酶单独表达时的1.33倍。

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《共表达N-乙酰转移酶和磷脂酶重组菌的构建及发酵优化》

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文件号：307016

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