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将脊尾白虾热休克蛋白90基因克隆到原核表达载体pET-30a中，经酶切验证和DNA测序鉴定后，将重组质粒转化表达宿主大肠杆菌Rosetta，优化温度、时间、IPTG和OD600表达条件进行诱导表达，收集菌液，进行SDS-PAGE和质谱检测，并用Quantity one软件分析蛋白表达水平。结果表明，成功构建了含脊尾白虾HSP90基因的重组表达载体pET-30a-HSP90，表达目的蛋白相对分子量为82.7kD，为HSP90蛋白。通过条件优化认为重组菌株Rosetta/pET-30a-HSP90的最佳诱导温度为37 ℃，最佳IPTG浓度为1.0 mmol/L，最佳诱导时机和诱导时间分别为0.58 h、7 h。

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《脊尾白虾热休克蛋白HSP90基因的原核表达与鉴定》

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文件号：160123

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