三疣梭子蟹Toll4基因克隆及其在病原和低盐胁迫中的表达特征分析

时间:2023-06-21 11:56:04
作者:张 杰,吕建建,刘 萍,李 健,王竹青,张小辉
关键字:三疣梭子蟹,PtToll4,基因克隆,先天免疫,表达分析
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采用RACE技术克隆得到三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)TLRs家族的一个新基因,将其命名为PtToll4。该基因cDNA全长为4276 bp,5¢和3¢非编码区分别为339 bp和1252 bp,编码一个含有895个氨基酸、分子量为102.5 kDa、理论等电点为6.03的蛋白质。PtToll4蛋白是一个跨膜蛋白,存在胞外区LRR、LRRCT结构域及保守的胞内区TIR结构域。同源性及系统进化分析显示,PtToll4氨基酸序列与中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis) EsToll2的同源性最高,为61%。实时荧光定量PCR结果显示,PtToll4基因在血细胞中的表达量最高,在肝胰腺中的表达量最低。利用副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)和对虾白斑综合征病毒(WSSV)对三疣梭子蟹进行注射感染,结果显示,经WSSV感染后,PtToll4基因在血细胞中的表达量显著提高,在6 h时出现峰值,为对照组的5.03倍(P

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