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摘要： 旨在应用环介导等温扩增技术（Loop-mediated isothermal amplification,LAMP）对布鲁氏菌进行研究。针对布鲁氏菌保守基因16S rDNA设计LAMP引物,通过浊度法对LAMP反应条件进行优化,应用建立好的LAMP反应条件进行特异性及灵敏性试验。结果显示：（1）优化后的反应条件是62℃恒温60 min,内引物1.50 µmol/µL、外引物0.20 µmol/µL、环引物1.0 µmol/µL。（2）该LAMP方法与3株布鲁氏菌均发生了扩增反应,达到阳性浊度值,而与小肠耶尔森（ATCC9510）、大肠杆菌（ATCC25922）、沙门氏菌（ATCC10708）和金黄色葡萄球菌（ACTT33591）等标准菌株没有扩增反应。（3）浊度法和实时荧光法两种方法的检测最低限分别为4.36 fg/µL和436 fg/µL,其灵敏度均高于普通PCR的最低检出值4.36 pg/µL。LAMP检测技术用于布病临床诊断具有快速、高效、便捷等特点,对于基层布病的病原学诊断具有实用价值。

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《LAMP技术快速诊断布鲁氏菌病的研究》

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文件号：225151

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