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为研究鱼类信号与转录激活因子3 (signal transduction and activator of transcription 3，STAT3)在抗病毒免疫应答中的作用，实验利用逆转录PCR(RT-PCR)和RACE-PCR技术从日本鳗鲡中扩增获得了STAT3及其剪切异构体(AjSTAT3-L和AjSTAT3-S)。AjSTAT3-L及AjSTAT3-S开放阅读框全长分别为2349和1470 bp，编码782和489个氨基酸。基因结构分析结果显示，AjSTAT3-L具有23个外显子，AjSTAT3-S缺失了第2、3、4、5、6、7及21个外显子。AjSTAT3-L类似于哺乳动物STAT3，由N端结构域(NTD，1~120位氨基酸)、卷曲螺旋结构域(CCD，140~313位氨基酸)、DNA结合结构域(DBD，325~462位氨基酸)和SH2结构域(577~672位氨基酸)构成。相较于AjSTAT3-L，AjSTAT3-S缺失了整个CCD结构域，且NTD结构域也缺失了69个氨基酸。系统进化分析结果显示，AjSTAT3-L和AjSTAT3-S位于硬骨鱼类STAT3分支的基部。脊椎动物STAT3聚为一支，并与STAT1和STAT4聚为一大支。免疫荧光结果显示，AjSTAT3-L及AjSTAT3-S均定位于细胞质。此外，过表达AjSTAT3-L和AjSTAT3-S能显著抑制Poly I∶C诱导的IFN和Mx启动子的活化。研究表明，实验所克隆鉴定的日本鳗鲡STAT3及其剪切异构体，均能负调控鱼类抗病毒免疫应答。

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《日本鳗鲡STAT3及其剪切异构体的克隆、亚细胞定位及功能分析》

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文件号：313879

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