如需要完整文档点击下方 "点击下载文档" 按钮

本文作者研究了赤霉素合成途径中的关键酶-贝壳杉烯合酶，对其功能的研究可以为以后优化品种提供基因层面的基础。首先通过RACE-PCR技术，从甜菜树叶片中克隆得到贝壳杉烯合酶基因（Ent-kaurene synthase gene，YlKS）的全长cDNA，共2 512 bp（GenBank登录号为KP872698），其ORF长度为2 232 bp，共编码743个氨基酸，预测蛋白质相对分子质量大小为84 987，蛋白质等电点为5.264，表明该蛋白质呈酸性。将该基因构建到表达载体pET32a中，得到重组质粒pET-32a-YlKS。通过将pGG/An2、pIRS和重组质粒pET-32a-YlKS 3个质粒共转入菌株BL21（DE3）中，得到重组菌株，并进行发酵。通过SDS-PAGE分析发现，重组蛋白成功得到了表达。最后通过对发酵产物进行萃取，并使用GC-MS进行检测，确定了该基因所编码的酶确实是贝壳杉烯合酶。

如需要完整文档点击下方 "点击下载文档" 按钮

《甜菜树贝壳杉烯合酶基因的克隆与原核表达》

将 完整文档 下载到本地，方便收藏和查阅

文件号：307242

点击下载文档