马铃薯腐烂茎线虫谷胱甘肽过氧化物酶基因(Dd-Gpx)的克隆与原核表达

时间:2023-01-30 17:32:38
作者:刘洋,何旭峰,刘建喜,丁中
关键字:马铃薯腐烂茎线虫,谷胱甘肽过氧化物酶,基因克隆,原核表达
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.10.022
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摘要: 旨在研究植物寄生线虫谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GPX)的结构和功能, 通过RACE技术克隆了马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)Gpx基因, 并成功克隆到pET-41b载体上进行融合表达。结果表明, 该基因cNDA全长950 bp, 含有1个681 bp的开放阅读框, 共编码226个氨基酸。生物信息学分析显示, 该蛋白N端有明显信号肽, 属于分泌蛋白。将其克隆到pET-41b载体在BL21(DE3)中进行原核表达, 结果显示, 在60 kD处有一条明显的带。经质谱鉴定, 此条带有7个肽段与马铃薯腐烂茎线虫GPX匹配。表明重组Dd-GPX蛋白表达成功。

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马铃薯腐烂茎线虫谷胱甘肽过氧化物酶基因(Dd-Gpx)的克隆与原核表达
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