禽腺病毒血清4型感染鸡组织中NLRP3基因转录水平的实时荧光定量PCR分析

时间:2023-09-04 01:58:29
作者:郭慧芳,李宁,王白玉,乔麒龙,黄庆,李永涛,王增,赵军*
关键字:禽腺病毒血清4型,鸡NLRP3基因,实时荧光定量PCR,组织炎症,转录水平,
DOI:10.11843/j.issn.0366-6964.2021.020
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摘要: 旨在分析禽腺病毒血清4型(FAdV-4)感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平,本研究设计鸡NLRP3特异性引物,利用RT-PCR扩增NLRP3基因180 bp片段并克隆至pMD-18T载体,制备重组质粒pMD-18T-NLRP3。以pMD-18T-NLRP3质粒作为标准品进行荧光定量PCR并建立标准曲线。通过反应条件优化,成功建立了检测NLRP3基因的实时荧光定量PCR方法,并利用该方法对致病性FAdV-4感染鸡组织中NLRP3基因的转录水平进行了分析。结果显示,所设计的NLRP3引物可特异性扩增鸡NLRP3基因,建立的实时荧光定量PCR对鸡NLRP3标准质粒的扩增曲线良好,标准品的拷贝数与Cq值呈现良好的线性关系。与对照组相比,NLRP3分子在FAdV-4感染鸡肝和脾中的转录水平极显著高于对照组(P

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禽腺病毒血清4型感染鸡组织中NLRP3基因转录水平的实时荧光定量PCR分析
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